Développement de méthodes de biologie synthétique appliquées à la génération de vaccins glycoconjugués contrôlés et à la modification des capacités de reconnaissance de protéines
| Doctorant : | Typhaine VIOLO |
| Directeur de thèse : | Cyrille GRANDJEAN , Directeur de recherche CNRS |
| co-directeur de thèse : | Jacques LEBRETON |
| Encadrant : | Emilie CAMBERLEIN , Maître de conférences Université |
| Financement : | Région Pays de la Loire |
| Date de la soutenance : | mardi 03 mars 2020, 14h00 |
| Modalité : | |
| Jury : |
|
Au cours de cette thèse, nous avons mis en place une technologie d’incorporation d’acides aminés non naturels de manière site-spécifique au sein du laboratoire et l’avons appliqué à deux problématiques. Les vaccins glycoconjugués actuels ne couvrent que 13 des 97 sérotypes de Streptococcus pneumoniae. L’utilisation d’une protéine porteuse immunogène permet d’élargir la couverture sérotypique en couplant l’utilisation d’antigènes polysaccharidiques avec des antigènes protéiques. Cependant, les méthodes de conjugaison actuelles ne permettent pas l’étude de l’association optimale entre ces deux antigènes. Dans une première partie, nous avons généré différents vaccins glycoconjugués homogènes en incorporant la Propargyl-Lysine dans la protéine porteuse du pneumoncoque (mPsaA) afin de maîtriser la position ainsi que le nombre des haptens. Les lectines reconnaissent leur ligand saccharidique avec une très bonne spécificité mais avec une affinité généralement faible. Dans une seconde partie de la thèse, nous nous sommes intéressés à l’incorporation d’acides aminés non naturels permettant de former des liaisons covalentes avec les sucres et ainsi augmenter les forces d’interaction entre des lectines et leurs ligands. Nous avons tenté d’incorporer un premier acide aminé non naturel original sans succès. Mais deux autres ont pu être incorporés, dont l’un d’eux au sein de 2 cibles protéiques, en quantité suffisante pour réaliser des tests d’affinité. Cette thèse a donc permis la mise en place d’un nouvel axe technologique au sein du laboratoire et d’en explorer des applications potentielles.
Publications
2020 |
Homogenous Glycoconjugate Produced by Combined Unnatural Amino Acid Incorporation and Click-Chemistry for Vaccine Purposes Article de journal Journal of visualized experiments : JoVE, 2020. |
2019 |
Site-Specific Conjugation for Fully Controlled Glycoconjugate Vaccine Preparation Article de journal Frontiers in Chemistry, 7 (November), p. 1–9, 2019, ISSN: 22962646. |
Lien
